細胞因子是由免疫細胞(如單核、巨噬細胞、T細胞、B細胞、NK細胞等)和某些非免疫細胞(內皮細胞、表皮細胞、纖維母細胞等)經刺激而合成、分泌的一類具有廣泛生物學活性的小分子蛋白質,具有調節固有免疫和適應性免疫 、血細胞生成、細胞生長以及損傷組織修復等多種功能。
細胞因子可被分為白細胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子超家族、集落刺激因子、趨化因子、生長因子等。眾多細胞因子在體內通過旁分泌、自分泌或內分泌等方式發揮作用,具有多效性、重疊性、拮抗性、協同性等多種生理特性,形成了十分復雜的細胞因子調節網絡,參與人體多種重要的生理功能。
細胞因子作為重要的蛋白藥物,可以通過原核表達和真核表達純化系統得到。蛋白純化后的生物學活性是檢測蛋白功能的重要指標,對蛋白的后續應用有重要影響。測定細胞因子生物學活性的方法可分為細胞增殖和增殖抑制法、細胞毒活性測定法、抗病毒活性測定法、趨化活性測定法、ELISA法等,不同的細胞因子生物學活性檢測的方法不同。
晶諾生物建立了專門的細胞因子活性測定細胞庫,有經驗豐富的專業人員,客戶提供蛋白、血液等樣品,可為客戶提供相關技術測活服務。
促進細胞增殖和增殖抑制法:
檢測細胞因子促生長活性或抑制生長活性是將不同稀釋度的待測樣品或細胞因子標準品與培養的細胞株共同培養一定時間,然后檢測細胞增殖數。前者的增殖細胞數與細胞因子的含量成正比,而后者的增殖細胞數與細胞因子的含量成反比。常用的檢測細胞增殖的方法有比色法、染色法和直接計數法等。比色法包括MTT、XTT、MTS和NAG等方法,可在酶標檢測儀上自動化檢測,較為常用。
細胞毒活性測定法:
許多細胞因子針對轉化的細胞及病毒感染的細胞具有溶細胞或抑制細胞生長的作用。檢測細胞因子溶細胞/細胞毒活性或抑制生長活性是將不同稀釋度的待測樣品或細胞因子標準品與培養的細胞株共同培養一定時間,然后用比色法檢測存活的靶細胞數,并與對照比較求得溶細胞或抑制細胞生長的百分率,或以OD值對樣品稀釋度作圖,繪制標準品的劑量反應曲線,從曲線上求得引起相應反應的待測樣品的含量。
抗病毒活性測定法:
檢測樣品中干擾素含量的常用方法,其檢測原理是用細胞因子樣品處理易感細胞,使細胞建立抗病毒狀態,然后用適量病毒攻擊細胞,評價病毒的復制量或病毒引起細胞病變的程度即可判斷樣品中細胞因子的生物活性。檢測抗病毒活性的具體方法包括測定細胞因子抑制病毒的致細胞病變效應(CPE)、抑制病毒蝕斑形成或抑制病毒的產量等。
趨化活性測定法:
多種細胞因子具有趨化活性,能誘導細胞定向遷移。趨化因子誘導細胞移動的方式包括趨化性和化學增活現象。趨化性(chemotaxis)是指誘導細胞向趨化因子化學濃度高的方向作定向移動,化學增活現象(chemokinesis)是指增強細胞的隨機運動。趨化性可采用瓊脂糖和微孔小室趨化試驗測定,化學增活可采用瓊脂糖小滴化學動力學試驗檢測。
ELISA法:
依據抗原抗體反應測定樣品中細胞因子含量,常用的有夾心法、競爭法等。
服務流程
- 客戶提供樣品及待測細胞因子信息;
- 確定合適的生物學活性測定方法;
- 進行生物學活性測定;
- 獲得生物學活性測定結果并進行分析;
發送結果:細胞因子生物學活性方法及流程、測定結果及數據分析。



