技術原理與實驗步驟
質粒是廣泛存在于細菌、放線菌、酵母菌等生物中，賦予這些生物抗藥、抗重金屬等特性，對質粒進行有目的的改造后可以用于目的基因的片段擴增、目的基因的特異表達等，已經成為現代生物學必不可少的工具。
質粒的構建主要用到常用的分子生物學實驗如PCR、限制性核苷酸酶切、DNA連接酶連接、轉化大腸桿菌感受態細胞等。PCR用來擴增目的基因片段，涉及引物設計、退火溫度的摸索、DMSO濃度優化等多種過程，快速準確的PCR對質粒構建過程有重要影響，然而有的基因片段由于GC含量高、含有特殊結構等，在進行PCR時特別困難；質粒載體改造需要進行各種目的基因片段的酶切、連接等過程，是很耗時的過程。
晶諾生物有專業的研究人員，從事分子生物學研究多年，對質粒構建富有經驗，可在短時間內高效率的完成構建過程。在產品研發的過程中，積累了豐富的質粒構建經驗，尤其擅長結核菌、熒光互補、融合蛋白等相關領域的質粒構建，可根據顧客需求提供相關技術服務。
結核桿菌基因PCR及質粒構建：
對基因組高GC含量的結核菌PCR有獨特的方法和豐富的經驗，可高效率地完成高難度基因PCR，根據客戶提供的載體信息，選擇合適的酶切位點，經酶切連接后構建需求質粒。
熒光互補技術(BiFC)質粒構建：
eGFP熒光蛋白合理的拆分并與目的蛋白相連，可用于研究蛋白相互作用，根據客戶需求，可提供熒光標記質粒及研究蛋白相互作用的BiFC質粒。
融合蛋白表達質粒構建：
融合蛋白是兩個蛋白通過柔性多肽linker相連，具有兩個蛋白的功能，并可能具有額外的優勢，如激活新的信號通路、特異的細胞靶向性等，在新藥物開發中有廣闊的前景，我們已經構建并表達了GMCSF-IL4、IL4-GMCSF、GMCSF-IL10、IL10-GMCSF等多種融合蛋白質粒，經驗豐富，根據客戶提供的基因、載體信息，我們可提供需求融合蛋白表達質粒。
服務流程：
- 客戶提供目的基因及載體信息及需求
- 設計引物，進行PCR，PCR產物、載體進行酶切并連接轉化，挑取菌落提取質粒測序
- 發送產品：構建好的陽性菌液及質粒，相關的引物信息，PCR、酶切電泳圖，測序結果。
服務周期：1-2周
