結(jié)核納米抗體定制服務(wù)！

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01 什么是納米抗體？

納米抗體(Nanobody)，即重鏈單域抗體VHH (variable domain of heavy chain ofheavy-chain antibody) ，它是最小的功能性抗原結(jié)合片段。相較于傳統(tǒng)抗體，納米抗體的分子量僅為15 kDa（約1/10），卻保留了高親和力與特異性，成為探索精準(zhǔn)醫(yī)療、疾病診斷及治療的關(guān)鍵工具。在結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis）研究中，納米抗體因其穿透力強(qiáng)、穩(wěn)定性高的特點，集傳統(tǒng)抗體和小分子藥物的優(yōu)點為一體，在疾病的診斷及治療方面有廣闊的應(yīng)用前景，為攻克耐藥性結(jié)核病提供了全新思路。

 

02 納米抗體的核心特點

(1)分子量小，穿透力強(qiáng)：納米抗體的體積僅2.5×4 nm，可輕松穿透細(xì)胞屏障，直達(dá)病灶（如結(jié)核肉芽腫），能更好地發(fā)揮作用。

(2)高穩(wěn)定性：納米抗體內(nèi)部二硫鍵的存在，使其耐高溫、易儲存，在85℃下仍活性完好、抗蛋白酶降解，且耐受高溫、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等致變性條件，適用于復(fù)雜樣本（如結(jié)核患者的痰液或組織樣本）檢測。

(3)高特異性：納米抗體的CDR3區(qū)較長，可形成指狀凸環(huán)，進(jìn)一步識別并結(jié)合傳統(tǒng)抗體難以觸及的隱藏抗原表位（如酶活性中心、病毒囊膜裂隙），對同源蛋白家族的交叉反應(yīng)率<1%，可以有效避免傳統(tǒng)抗體因輕鏈干擾產(chǎn)生的假陽性。

(4)高親和力：納米抗體僅由重鏈可變區(qū)（VHH）構(gòu)成，其互補(bǔ)決定區(qū)（CDR3）更長且構(gòu)象靈活（通常含16-21個氨基酸），能形成更深的抗原結(jié)合口袋，增強(qiáng)與抗原表位的互補(bǔ)性。親和力（KD值）可達(dá)0.1~10 nM（傳統(tǒng)抗體通常為1~100 nM）。

(5)高親水性：納米抗體FR2區(qū)含4個特征性親水殘基，CDR區(qū)中親水氨基酸占比高達(dá)45%~65%，使其在溶解性、抗聚集性和低吸附性上全面超越傳統(tǒng)抗體。

(6)結(jié)構(gòu)簡單，易改造：納米抗體易于進(jìn)行基因工程改造，可串聯(lián)多價或多特異性結(jié)構(gòu)，同時結(jié)合多個抗原，或偶聯(lián)藥物、熒光標(biāo)記物，形成融合蛋白進(jìn)行靶向治療。

(7)制備簡單，易生產(chǎn)：納米抗體可在細(xì)菌、噬菌體、酵母等微生物中高效表達(dá)，可大規(guī)模生產(chǎn)，降低成本。

(8)低免疫原性：納米抗體的骨架區(qū)（FR）與人類VH區(qū)序列同源性大于80%，易于人源化，且納米抗體不含F(xiàn)c段尾端，從而避免了Fc段引起的補(bǔ)體反應(yīng)，對人體的免疫原性弱。

 

03 服務(wù)流程

第一步：制備抗原

抗原可由晶諾生物制備或由客戶提供*。

第二步：羊駝/駱駝免疫

免疫前預(yù)留陰性血清。免疫羊駝/駱駝，一般要免疫 4~5 次。從第二次免疫后開始采外周血，分離血清檢測血清效價。分離羊駝/駱駝外周血單個核細(xì)胞。

第三步：VHH噬菌體庫生成

從羊駝/駱駝血淋巴細(xì)胞中提取RNA，反轉(zhuǎn)錄為cDNA，再進(jìn)行VHH擴(kuò)增，電轉(zhuǎn)化至感受態(tài)細(xì)胞后建立噬菌體文庫，經(jīng)噬菌體展示技術(shù)得到多株陽性克隆。

第四步：淘選和篩選

至少3輪淘選（液相、固相淘選和細(xì)胞淘選），用ELISA檢測方法鑒定和評估陽性克隆篩選，對陽性克隆進(jìn)行測序和測序結(jié)果分析。

第五步：VHH-Fc抗體生產(chǎn)

采用高效重組表達(dá)系統(tǒng)，大量表達(dá)純化可溶性納米抗體，采用相應(yīng)檢測方法評估所得納米抗體的抗原結(jié)合特異性、穩(wěn)定性等各方面性能。

*特色服務(wù)

晶諾生物擁有結(jié)核分枝桿菌重組抗原蛋白庫，現(xiàn)有蛋白抗原50種以上，并支持結(jié)核抗原定制服務(wù)，特有的恥垢分枝桿菌表達(dá)系統(tǒng)M.smegmatis mcc155Δmsmeg1583更能還原結(jié)核分枝桿菌目的蛋白表達(dá)、合成以及修飾狀態(tài)，已利用該菌株成功表達(dá)純化EchA6(Rv0905)、Rv3875等在大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)難以表達(dá)的蛋白。

分枝桿菌蛋白翻譯后修飾及恥垢分枝桿菌表達(dá)系統(tǒng)的構(gòu)建

 

04 晶諾納米抗體產(chǎn)品

貨號	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
GRVP1636	Rv1636 納米抗體對	100ug/500ug
GRVP1804	Rv1804c 納米抗體對	100ug/500ug
GRVP1980	Rv1980c 納米抗體對	100ug/500ug
GRVP2873	Rv2873 納米抗體對	100ug/500ug
GRVP2875	Rv2875 納米抗體對	100ug/500ug
GRVP3804	Rv3804c 納米抗體對	100ug/500ug
GRVP3875	Rv3875 納米抗體對	100ug/500ug
GRVN1636	Rv1636 納米抗體	100ug/500ug
GRVN1804	Rv1804c 納米抗體	100ug/500ug
GRVN1980	Rv1980c 納米抗體	100ug/500ug
GRVN2873	Rv2873 納米抗體	100ug/500ug
GRVN2875	Rv2875 納米抗體	100ug/500ug
GRVN3804	Rv3804c 納米抗體	100ug/500ug
GRVN3875	Rv3875 納米抗體	100ug/500ug

 

05 晶諾納米抗體親和力案例分享

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