技術原理與實驗步驟
免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質(zhì)印跡(western blot)，它是根據(jù)抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法，具有高分辨力、高特異性和敏感性，是蛋白分析的一種常規(guī)技術，可常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進行定性和半定量分析。蛋白經(jīng)過PAGE凝膠電泳及轉(zhuǎn)膜后，添加一抗可與蛋白特異結合，加入標有辣根過氧化物酶的二抗可與一抗結合，最后通過與加有底物的顯色液反應，通過化學發(fā)光或膠片顯色達到檢測蛋白的目的。
服務流程
- 客戶提供樣品;
- 提取樣品蛋白，測定蛋白濃度，確定上樣量；
- 蛋白進行SDS-PAGE凝膠電泳；
- 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)膜；
- 轉(zhuǎn)膜后用脫脂奶粉封閉，一抗孵育后洗滌并進行二抗孵育；
- 二抗孵育好后洗滌，化學發(fā)光法或膠片顯色；
- 發(fā)送結果：蛋白樣品及測定濃度、上樣量等信息，抗體信息，顯色結果及分析。
